胰蛋白/酶-EDTA消化液  含酚紅-100ML

胰蛋白/酶-EDTA消化液  含酚紅-100ML

2.5g 豬胰蛋白/酶和0.2g EDTA溶于1升PBS。不含鈣和鎂，含酚紅。過(guò)濾除菌

產(chǎn)品說(shuō)明：

在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個(gè)細(xì)胞懸液）以及傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白/酶，EDTA等，其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞外基質(zhì)）水解，使組織或貼壁細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。

胰蛋白/酶消化液(Trypsin Solution)含0.25%胰/酶，溶于無(wú)鈣鎂平/衡鹽溶液中，經(jīng)過(guò)濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞和組織的消化。本產(chǎn)品具有方便快速、穩(wěn)定安全、細(xì)胞狀態(tài)好等特點(diǎn)。通常室溫消化2分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。

使用方法：

1. 貼壁細(xì)胞的消化：

a) 吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。

b) 加入少量胰蛋白/酶消化液，蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置1-2分鐘。不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同，對(duì)于貼壁牢固的細(xì)胞可適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間。

c) 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除消化液。加入含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，可加入胰蛋白/酶消化液重新消化。

e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰/酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰/酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

2. 組織的消化：

不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項(xiàng)：

1．由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況，確定最佳消化時(shí)間；消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況；

2．本產(chǎn)品不含抑菌劑，在使用過(guò)程中要特別注意無(wú)菌操作，避免消化液被微生物污染；

3．不宜4℃長(zhǎng)期保存，切忌反復(fù)凍融，小量使用時(shí)建議分裝凍存；

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。